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解決済みのQ&A

cre/loxP systemを使用して実験をしようと考えています。噂で聞いた話では、creやl...

shin_oh0127さん

cre/loxP systemを使用して実験をしようと考えています。噂で聞いた話では、creやloxP-STOP-loxP plasmidは他のplasmidと比較して変性しやすいと聞いていますが、本当でしょうか?

たとえば凍結融解を繰り返していると、すぐに変性してしまうのでしょうか?

  • 質問日時:
    2010/2/8 17:17:11
  • 解決日時:
    2010/2/8 18:56:39
  • 閲覧数:
    680
    回答数:
    1

ベストアンサーに選ばれた回答

hpv16e6e7さん

聞いたことがありません。
そのうわさの出典はどこでしょうか?
2つのベクターは別物なので、両方とも他のベクターと性質が異なるというのは考えにくいと思いますが。

LoxP-STOP-loxP plasmidにloxPサイトが2箇所にあるので、
大腸菌内などでspontaneousに組み替えられてデリーションを起こす可能性があるという話のことでは無いでしょうか?
(34bpなので、そんなに頻度は高くないと思いますが)

または、細胞に導入するのが前提のベクターなので、スーパーコイルDNAにニックが入らないように気をつけて扱うようにという話が、
変性しやすいと発展したのかもしれません。

質問した人からのお礼

  • ありがとうございます。噂の出所は先輩の先輩から聞いた話で定かではありません。とりあえず通常通りやってみたいと思います!
  • コメント日時:2010/2/8 18:56:39

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