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cre/loxP systemを使用して実験をしようと考えています。噂で聞いた話では、creやl...

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質問者

shin_oh0127さん

2010/2/817:17:11

cre/loxP systemを使用して実験をしようと考えています。噂で聞いた話では、creやloxP-STOP-loxP plasmidは他のplasmidと比較して変性しやすいと聞いていますが、本当でしょうか?

たとえば凍結融解を繰り返していると、すぐに変性してしまうのでしょうか?

閲覧数:
726
回答数:
1

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ベストアンサーに選ばれた回答

hpv16e6e7さん

2010/2/817:45:19

聞いたことがありません。
そのうわさの出典はどこでしょうか?
2つのベクターは別物なので、両方とも他のベクターと性質が異なるというのは考えにくいと思いますが。

LoxP-STOP-loxP plasmidにloxPサイトが2箇所にあるので、
大腸菌内などでspontaneousに組み替えられてデリーションを起こす可能性があるという話のことでは無いでしょうか?
(34bpなので、そんなに頻度は高くないと思いますが)

または、細胞に導入するのが前提のベクターなので、スーパーコイルDNAにニックが入らないように気をつけて扱うようにという話が、
変性しやすいと発展したのかもしれません。

質問した人からのコメント

2010/2/8 18:56:39

ありがとうございます。噂の出所は先輩の先輩から聞いた話で定かではありません。とりあえず通常通りやってみたいと思います!

ちょい足しを取り消しますが
よろしいですか?

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