解決済みの質問
メセルソンスタールの実験について。 14N培地の大腸菌を15N培地に入れ、10回分裂...
メセルソンスタールの実験について。
14N培地の大腸菌を15N培地に入れ、10回分裂させ、14N培地にいれて半保存的複製を調べるものと習いました。
1.
なぜわざわざ15Nにいれてるんですか？最初から14Nで分裂させればいいのでは？
2.1世代には中間の重さ(？)のＤＮＡができるそうですが、なぜ軽くなるんですか？
3.遠心分離をするそうですが、全くわかりません。教えて下さい
- 補足
- 1、2がよくわかりません。もう少し詳しく教えていただけますか？
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- 質問日時：
- 2012/2/15 23:05:47
- ケータイからの投稿
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- 解決日時：
- 2012/2/16 02:30:08
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- 2
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ベストアンサーに選ばれた回答
軽いとか重いとかについて
Nは窒素ですよね、だから原子量14の窒素より、同位体の原子量15の窒素の方が重いのは当然ということです。なので最初15Nのみを含むDNAを準備し、14Nのみの培地で培養すると当然15と14Nの両方を含むDNAができますので15NのみのDNAより軽くなりますよね！
15Nを含む培地で培養させると15N のみを含むDNAができます。これは14Nのみで出来ているDNAより思いです。
次に、14Nのみを含む培地で複製すると一本が15Nのみで、もう一本が14Nのみで出来ているDNAができます。これは14NのみのDNAより重く15NのみのDNAより軽いです。いま14NのDNA、14Nと15NのDNA、15のみのDNAを
(14,14)....1
(14,15)....2
(15,15)....3
と表記します。これらを含む溶液を遠心分離すると重い物から、したの方にたまるので、DNAを染色しておくと上から1.2.3のDNAが集まった帯が観察できます。
質問に十回とありますが別にそうとは限りません、
半保存的複製を前提にすると、例えば(15.15)のDNAを14Nのみの培地で培養すれば、一本が15Nのみ、一本が14Nのみで構成されたDNA(14,15)のDNAが二本できます。もう一度この培地で複製させると、一本の(14,15)からは(14,14)が一本、(14,15)が一本できるので(14,14)が二本(14,15)が二本できると推測できます。
もう一度複製すると、一本の(14,14)から(14.14)が二本できるので、いま、三回の複製で総計8本のDNA、(14,14)が六本(14,15)が二本になると推測できます。
本当に半保存的複製が行われていると遠心分離、DNAの染色を行うことで,
複製0回､､､(15,15)のみ一本の帯
複製1回､､､(14,15)のみ一本の帯
複製2回以降､､､(14,15)と(14,14)の帯がそれぞれ一本で二本の帯
が観察されます。逆に半保存的複製が行われていなければ帯がなん本も見えたりします。
自分としては分かりやすく説明したつもりです。わからなければまた質問ください。
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- 回答日時：2012/2/16 00:02:14
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ベストアンサー以外の回答
（1件中1〜1件）
教科書見れば全て書いてあると思いますが…
1重い元素で標識し、区別するため
2半保存的複製そのまんまです
3重さ毎に沈殿させるため
補足
15Nと14Nでは前者が重いです
15Nの培地で繰り返し培養し、15Nから出来た2本鎖のDNAを作ることで14Nの培地で培養したとき区別できるからです
15Nで培養したDNA2本鎖は2本共15Nを含んでいるのは大丈夫ですか？
半保存的複製はこの2本鎖がほどけて各々に相補的に新しい鎖が生成されます
この生成された鎖は14Nなので、15Nと14Nが結合してるDNAが2つ出来るのはわかると思います
これは元のN15が2本から出来たDNAより軽いのはわかりますよね？
つまりそういうことです
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- 編集日時：2012/2/15 23:57:15
- 回答日時：2012/2/15 23:32:51
質問した人からのコメント
理解出来ました。