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1M Tris-HCl(pH6.8)を100mlと1.5 M Tris-HCl(pH.8.0)調整について教えてく...

min********さん

2012/8/1122:00:13

1M Tris-HCl(pH6.8)を100mlと1.5 M Tris-HCl(pH.8.0)調整について教えてください!
Trisを量ってビーカーに入れ、MiliQ水を100ml入れるところまでは分かるのですが、
HCLを何ml入れればよいのでしょう。

お願いします。

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nor********さん

2012/8/1715:58:33

Trisを必要量、量りとる。

それを最終的に合わせたい容量の8~9割程度の水に溶解する。

pHを測定しながら、HClで目的のpHに合わせる。

最後に、目的の容量にメスアップして完成。

100ml作りたいなら、Trisを100mlの水に溶かしてダメ。
厳密にいえば、Trisの分だけ、容量は加えた水の量よりも増えるし、
pHを合わせるために加えるHClの分も増える。
だから、それらの「増加分」を考慮して、
最終容量よりも少ない水に溶かすのが基本。

なお、Trisは水に溶かすと発熱し、温度が上がる。
温度の変化に伴いpHが変動するので、
pH測定時には水温が室温にまで戻ってから測定する。

簡易的に、以下の補正式を使用してもOK。

温度が1℃上がる毎に、pHが0.03減少するということで。
(補正pH値)=(目的のpH)-{(現在の溶液温度)-20}×0.03
(溶液温度20℃を基準とした場合)
(「秀潤社 バイオ実験イラストレイテッド① 分子生物学実験の基礎」より)

質問した人からのコメント

2012/8/19 00:35:04

成功 ありがとうございます。
参考にして実験してみます。

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